"утверждаю" Зам руководителя Департамента государственного контроля качества, эффективности, безопасности лекарственных средств и медицинской техники мз РФ
|
Скачать 64.17 Kb.
|
|
"УТВЕРЖДАЮ" Зам. руководителя Департамента государственного контроля качества, эффективности, безопасности лекарственных средств и медицинской техники МЗ РФ В.Е. Акимочкин. 30 января 2002 г. И Н С Т Р У К Ц И Я по применению набора реагентов для определения общей активности креатинкиназы кинетическим методом в сыворотке крови Креатинкиназа ФС «ДДС» Рекомендована к утверждению экспертной комиссией по лабораторным реагентам Комитета по новой медицинской технике Минздрава РФ Протокол № 7 от 27 августа 2001 г. НАЗНАЧЕНИЕ Набор предназначен для количественного определения активности креатинкиназы в сыворотке крови человека кинетическим методом в клинико-диагностических и биохимических лабораториях и научно-исследовательской практике. Набор выпускается в трех видах фасовки и рассчитан, соответственно, на проведение 25, 125 или 500 определений при расходе 1,0 мл рабочего реагента на один анализ. ПРИНЦИП МЕТОДАКреатинкиназа катализирует реакцию образования АТФ в присутствии креатинфосфата и АДФ. Гексокиназа при наличии АТФ катализирует реакцию фосфорилирования глюкозы с образованием глюкозо-6-фосфата. При наличии глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы реакция дегидрирования глюкозо-6-фосфата сопровождается образованием НАДФН. Скорость синтеза НАДФН, сопровождающаяся повышением оптической плотности образца, прямо пропорциональна активности креатинкиназы и измеряется фотометрически при длине волны 340 нм. СОСТАВ НАБОРА Реагент 1: буферный раствор, рН 6,7, содержащий имидазол, 125 ммоль/л; креатинфосфат, 37 ммоль/л; глюкозу, 25 ммоль/л; N-ацетилцистеин, 25 ммоль/л; ацетат магния, 12 ммоль/л; ЭДТА-Na, 2,5 ммоль/л; азид натрия, 0,095% – 1 флакон (20 мл), 5 флаконов (по 20 мл) или 5 флаконов (по 80 мл). Реагент 2: раствор, содержащий АДФ, 10 ммоль/л; НАДФ, 10 ммоль/л; АМФ, 25 ммоль/л; пентофосфат диаденозина, 50 мкмоль/л; глюкозо-6-фосфатдегидрогеназу, 7500 Е/л; гексокиназу, 12500 Е/л; азид натрия, 0,095% – 1 флакон (5,0 мл), 1 флакон (25 мл) или 1 флакон (100 мл). АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Набор обеспечивает линейную область определения активности креатинкиназы в диапозоне от 20 Е/л до 1000 Е/л, отклонение от линейности не превышает 5%. Чувствительность – не более 15 Е/л, коэффициент вариации результатов определений – не более 5%. Качество набора может проверяться по отечественным или зарубежным контрольным сывороткам, аттестованным данным методом. Нормальные величины активности креатинкиназы в сыворотке крови у женщин составляют 24 - 170 Е/л, у мужчин – 24-195 Е/л. Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон значений нормальных величин для обследуемого контингента людей. ОБРАЗЦЫ Негемолизированная сыворотка крови. Сыворотку крови следует отделить от форменных элементов крови не позднее, чем через 1 час после забора крови. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Потенциальный риск применения набора – класс 2a. В реагентах 1 и 2 содержится токсичный компонент – азид натрия. При работе с ними следует соблюдать осторожность и не допускать попадания на кожу и слизистые; при попадании немедленно промыть пораженное место большим количеством проточной воды. При проглатывании следует выпить 0,5 л теплой воды и вызвать рвоту. Меры предосторожности – соблюдение «Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г.). При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, т.к. образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель вирусной инфекции. ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ: – Спектрофотометр, программируемый фотометр или биохимический анализатор, длина волны 340 нм, термостатируемая кювета с длиной оптического пути 10 мм; – термостат, обеспечивающий температуру +37±1ºС; – секундомер; – цилиндры стеклянные мерные вместимостью 50 и 100 мл; Инструкция составлена: генеральным директором ЗАО «Диакон-ДС», к.б.н. Шарышевым А.А., зам. директора по науке Пущинского медицинского центра МОРАН, д.м.н. Косяковой Н.И. – пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкости 40 и 1000 мкл; – колба коническая вместимостью 200 мл; – 0,9% раствор NaCl ( физиологический раствор ); – перчатки резиновые или пластиковые. ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ Приготовление рабочего реагента: смешать в колбе конической вместимостью 200 мл 4 объема реагента 1 и один объем реагента 2. Тщательно закрыть флаконы с реагентами 1 и 2 непосредственно после каждого использования. Рабочий реагент можно хранить в темном месте при температуре +2-8ºС не более 3 недель или при комнатной температуре (+18-25ºС) не более 2 дней. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗАПеред проведением анализа рабочий реагент следует нагреть до температуры +37ºС в течение 10 минут. Компоненты реакционной смеси отбирать в количествах, указанных в таблице. Таблица.
Пробу перемешать и инкубировать в кювете с длиной оптического пути 10 мм при температуре +37ºС в течение 1 минуты. Измерить оптическую плотность пробы (Е1) при температуре +37ºС при длине волны 340 нм против воздуха, включить секундомер и через 1 минуту (точно!) аналогично измерить оптическую плотность пробы (Е2). Рассчитать ΔЕ/мин = Е2 – Е1. Примечание. При использовании автоматических или полуавтоматических биохимических анализаторов количество реагентов и анализируемых образцов в зависимости от объема используемой кюветы может быть пропорционально изменено (соотношение сыворотки крови к рабочему реагенту составляет 1:25). РАСЧЕТЫ Активность креатинкиназы в сыворотке крови (в Е/л) определить по формуле: А = ΔЕ/мин х 4127, где: А — активность креатинкиназы, Е/л; ΔЕ/мин — изменение оптической плотности пробы за одну минуту, ед. опт. плотн./мин; 4127 — фактор пересчета для выражения активности креатинкиназы в Е/л. Примечание. 1 Е/л = 16,67 нмоль/л/( с x л ). Для каждого автоматического или полуавтоматического биохимического анализатора следует уточнить фактор пересчета, используя контрольные сывороточные калибраторы, аттестованные данным методом (например, TruCal U, фирма DiaSys, Германия). УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРАНабор должен храниться при температуре +2-8ºС в упаковке предприятия - изготовителя в течение всего срока годности. Допускается хранение набора при температуре до +25ºС не более 5 суток. Замораживание компонентов набора не допускается. Срок годности набора — 12 месяцев. Реагенты 1 и 2 после вскрытия флаконов можно хранить в темном месте при температуре +2-8ºС в течение всего срока годности набора при условии достаточной герметичности флаконов. Рабочий реагент можно хранить в темном месте при температуре +2-8ºС не более 3 недель или при комнатной температуре (+18-25ºС ) не более 2 дней. При активности креатинкиназы в сыворотке крови выше 1000 Е/л анализируемую пробу следует развести физиологическим раствором в 5 раз, повторить анализ и полученный результат умножить на 5. Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по применению набора. По вопросам, касающимся качества набора Креатинкиназа ФС «ДДС», следует обращаться в ЗАО “Диакон-ДС” по адресу: 142290, г. Пущино, Московской обл., пр. Науки, 5; тел. факс (0967) 79-05-54, 79-05-28 и в Институт государственного контроля лекарственных средств НЦ ЭГКЛС Минздрава РФ по адресу: 117246, г. Москва, Научный проезд, 14, тел. (095) 120-60-95, 120-60-96. Генеральный директор ЗАО «Диакон-ДС» кандидат биологических наук А.А. Шарышев. Зам директора по науке Пущинского медицинского центра МОРАН доктор медицинских наук Н.И. Косякова. |
Похожие:
 |
"утверждаю" Зам руководителя Департамента государственного контроля... Рекомендована к утверждению экспертной комиссией по лабораторным реагентам Комитета по новой медицинской технике Минздрава РФ |
 |
"утверждаю" Руководитель Департамента государственного контроля качества,... Набор предназначен для количественного определения активности аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови человека в клинико-диагностических... |
|
Федеральная служба по надзору в сфере здравоохранения и социального... Данные о результатах выборочного контроля качества лекарственных средств, проведенного в 2011году 13 |
|
Федеральная служба по надзору в сфере здравоохранения и социального развития Итоги государственного контроля качества лекарственных средств, мониторинга безопасности лекарственных препаратов, контроля проведения... |
|
Приказ 16 июля 1997 г. N 214 о контроле качества лекарственных средств,... В целях повышения эффективности внутриаптечного контроля качества лекарственных средств, изготовляемых в условиях аптечных организаций... |
|
Приказ 16 июля 1997 г. N 214 о контроле качества лекарственных средств,... В целях повышения эффективности внутриаптечного контроля качества лекарственных средств, изготовляемых в условиях аптечных организаций... |
|
Приказ 16 июля 1997 г. N 214 о контроле качества лекарственных средств,... В целях повышения эффективности внутриаптечного контроля качества лекарственных средств, изготовляемых в условиях аптечных организаций... |
|
Приказ 16 июля 1997 г. N 214 о контроле качества лекарственных средств,... В целях повышения эффективности внутриаптечного контроля качества лекарственных средств, изготовляемых в условиях аптечных организаций... |
|
Приказ от 16 июля 1997 г. N 214 о контроле качества лекарственных... В целях повышения эффективности внутриаптечного контроля качества лекарственных средств, изготовляемых в условиях аптечных организаций... |
|
Приказ от 16 июля 1997 г. N 214 о контроле качества лекарственных... В целях повышения эффективности внутриаптечного контроля качества лекарственных средств, изготовляемых в условиях аптечных организаций... |
|
Приказ от 16 июля 1997 г. N 214 о контроле качества лекарственных... В целях повышения эффективности внутриаптечного контроля качества лекарственных средств, изготовляемых в условиях аптечных организаций... |
|
Приказ от 16 июля 1997 г. N 214 о контроле качества лекарственных... В целях повышения эффективности внутриаптечного контроля качества лекарственных средств, изготовляемых в условиях аптечных организаций... |
|
Приказ от 16 июля 1997 г. N 214 о контроле качества лекарственных... В целях повышения эффективности внутриаптечного контроля качества лекарственных средств, изготовляемых в условиях аптечных организаций... |
|
Приказ от 16 июля 1997 г. N 214 о контроле качества лекарственных... В целях повышения эффективности внутриаптечного контроля качества лекарственных средств, изготовляемых в условиях аптечных организаций... |
|
Приказ от 16 июля 1997 г. N 214 о контроле качества лекарственных... В целях повышения эффективности внутриаптечного контроля качества лекарственных средств, изготовляемых в условиях аптечных организаций... |
|
Должностная инструкция site qc manager / Менеджер контроля качества... Он назначается руководителем департамента контроля качества головного офиса и входит в состав департамента качества |