При постановке ифа
|
Скачать 463.95 Kb.
|
Отказ термостата Если обнаружено, что термостат не обеспечивает необходимой температуры, то наилучшим выходом следует признать приоста- новление работы. Распространенная ошибка при отказе термостата – постанов- ка ИФА при пониженной температуре, но с увеличением времени инкубации. К сожалению, различные тест-системы по-разному реагируют на изменение температуры и времени инкубации, поэтому универ- сальных рецептов работы при неисправном термостате нет. Отсутствие места в холодильнике В случае, если отсутствует возможность размещения набо- ров при хранении в холодильнике, следует обеспечить хранение 19 хотя бы основных компонентов: планшетов, конъюгата, концен- тратов растворов для разведения сывороток и конъюгата, конт- рольных образцов. Буферные растворы (ФСБТ, ЦФР) и таблетки ОФД обычно менее чувствительны к изменению температуры хранения. Следует учитывать, что серии компонентов подобраны таким образом, что нежелательно использовать, например, конъюгат се- рии Х из наборов серии А, вместо конъюгата серии У при постанов- ке наборов того же наименования, но серии В. Поэтому необходимо принять меры, предотвращающие возможное изменение комплек- тации наборов. 20 6. Внешний и внутренний контроли Все возможные ошибки постановки и неисправности оборудова- ния перечислить невозможно. Однако можно проверить себя, после чего либо искать причину неправильного результата, либо с некото- рой степенью уверенности утверждать, что все сделано правильно. Паспорт производителя К каждой серии наборов производитель прикладывает паспорт, в котором отражены, в том числе, значения ОП К+ и ОП К–. В случае, если получены результаты, сильно отличающиеся от паспортных, следует проверить еще раз правильность постановки ИФА и, исклю- чив возможность ошибки в проведении анализа и интерпретации полученных результатов, обратиться к производителю тест-систем. Панели и стандарты Внутренние контроли (ОП К+ и ОП К–) далеко не всегда в доста- точной мере отражают чувствительность и специфичность тест-систе- мы. Более полную информацию можно получить при использовании панелей сывороток или стандартных образцов. В настоящее время в России доступны панели сывороток, содержащих и не содержащих антитела к ВИЧ и гепатиту С, панель сывороток, содержащих им- муноглобулины класса М к вирусу гепатита А, а также стандартный образец HBs-антигена. В ближайшее время ожидается появление панели сывороток, содержащих различные количества HBs-антиге- на. Все серии вышеперечисленных панелей и стандартного образца при выпуске аттестуются Государственным научно-исследователь- ским институтом стандартизации и контроля медицинских иммуно- биологических препаратов (ГИСК) им. Л.А. Тарасевича. Если в лаборатории нет возможности приобрести панели ГИСК, либо по «нужной» инфекции панели отсутствуют, то жела- тельно иметь хотя бы небольшие внутрилабораторные контроли (6–8 сывороток, проверенных ранее, которые расфасовывают в микропробирки и хранят в замороженном виде). Следует учиты- вать, что при хранении и многократных замораживаниях-оттаива- ниях возможно падение специфической активности. 21 7. Сравнение с результатами других диагностических методов Любой диагностический метод имеет свои ограничения. Сов- ременный уровень науки и техники пока не позволяет создать диа- гностические методы, обладающие 100-процентными чувствитель- ностью и специфичностью. Поэтому не следует сразу отвергать ре- зультаты ИФА, если они противоречат результатам, полученным другими методами. Точно также не следует сразу отвергать резуль- таты других методов в том случае, если они противоречат ИФА. Более того, совместное использование различных диагностических методов позволяет с большей вероятностью ставить правильный диагноз, либо оценивать вероятность правильности поставленного диагноза (см. раздел «Прогнозируемые значения»). В целом существует уже сложившийся опыт применения стан- дартных методов диагностики, поэтому ошибки при интерпретации результатов встречаются относительно редко. Из новых методов наиболее быстро развивается метод полимеразной цепной реак- ции (ПЦР). Отношение к ПЦР на нынешнем этапе некритичное, многими врачами этот метод воспринимается как «золотой стан- дарт», поэтому при расхождении результатов с ИФА результаты ПЦР принимаются чаще как более верные. По оценкам западных специалистов этот период сменится периодом недоверия и необъективной критики метода ПЦР и лишь через 5–10 лет отношение к нему станет объективным. 22 Приложение Чувствительность и специфичность Применяя тот или иной метод диагностики, лечащий врач часто хотел бы знать – с какой вероятностью можно доверять мето- ду. Самый лучший метод, с точки зрения лечащего врача, должен иметь стопроцентную надежность, хотя по абсолютному большинс- тву заболеваний нынешний уровень науки и техники пока не поз- воляет создать такие методы. Для того, чтобы формализовать практическую ценность раз- личных методов диагностики, были введены понятия чувствитель- ности, специфичности, прогнозируемого значения. Эти понятия применимы для любого качественного, т.е. отличного от количест- венного, метода диагностики заболеваний, однако широкое приме- нение нашли только в лабораторной диагностике. Чувствительность – доля больных (инфицированных), которые признаны больными (инфицированными) в результате применения метода диагностики, от общего количества больных (инфицирован- ных), проверенных с помощью данного метода диагностики. Специфичность – доля здоровых, которые признаны здоровыми в результате применения метода диагностики, от общего количест- ва здоровых, проверенных с помощью данного метода диагностики. В идеале, для того, чтобы определить чувствительность и спе- цифичность метода диагностики, необходимо с его помощью прове- рить все население Земли; при этом надо заранее знать, кто из жи- телей является здоровым, а кто больным. Именно тогда и только тогда чувствительность и специфичность равны вероятности того, что метод диагностики дал правильный результат. Так как на практике такое измерение провести невозможно, используются методы оценки чувствительности и специфичности с помощью наборов (панелей) образцов исследуемых материалов, ко- торые обычно достаточно хорошо проверены различными другими методами и, зачастую, дополнены сведениями из истории болезни. Чем более правильно подобраны образцы панели, тем ближе результаты проверки метода диагностики на ней совпадут с идеаль- 23 Таблица 1 ным случаем. В настоящее время все проблемы составления пане- лей не решены, что приводит к многочисленным ошибкам и дис- куссиям. Коротко можно назвать некоторые из серьезных проблем: региональные различия; представительство образцов от больных несколькими болезнями; представительство образцов от больных другими заболеваниями, но не болеющих именно тем заболеванием, для диагностики которого предназначен метод; временной дрейф. Обычно достаточно трудно оценить все вероятности, поэтому на практике часто просто сравнивают по чувствительности и спе- цифичности две-три тест-системы разных производителей с целью выбора лучшей. Как правильно сравнить две тест-системы? Для того, чтобы сравнить две тест-системы по чувствитель- ности и специфичности, надо взять панель (назовем ее панель А) и одновременно, «руками» одного лаборанта, поставить анализ в обеих тест-системах. Если это возможно, то хорошо бы повторить сравнение в другой день «руками» другого лаборанта. Затем все это повторить с использованием панели В, произведенной другим производителем. Возможные варианты полученных результатов приведены в таблице 1. № варианта Тест- система Панель Чувствительность Специфичность 1 1 А 98 96 В 96 96 2 А 94 95 В 92 96 2 1 А 98 96 В 94 92 2 А 93 91 В 95 96 3 1 А 98 92 В 95 91 2 А 82 98 В 85 98 4 1 А 98 92 В 95 91 2 А 94 96 В 90 96 24 В варианте 1 следует выбрать тест-систему 1 (ее чувствитель- ность и специфичность выше). В варианте 2 необходима проверка на дополнительных пане- лях (чувствительность и специфичность 1 тест-системы выше при проверке с помощью панели А, но ниже при проверке с помощью панели В). В варианте 3 следует выбрать тест-систему 1 (чувствитель- ность тест-системы 1 выше при проверке на обеих панелях, специ- фичность ниже; но при этом разница в чувствительности намного превышает разницу в специфичности). В варианте 4 выбор затруднен. Обычно в таких случаях учи- тывают другие факторы (особенности инфекции, воспроизводи- мость и т.д.). Типичные ошибки при сравнении тест-систем, оценке чувствительности и специфичности Пример 1. С помощью тест-системы С проверяется большой контингент пациентов, некоторые из них признаются положитель- ными. Положительные в тест-системе С образцы исследуются с помощью тест-системы D, затем положительные в тест-системе С образцы передаются на подтверждение более надежным методом Е, и составляется примерно такая таблица: Тест- система Количество образцов, признанных отрицательными Количество образцов,признанных положительными Подтверждено положительных методом Е С 960 40 30 D 10 30 30 Таблица 2 На основании данных таблицы делается вывод о том, что специфичность тест-системы С составляет 75% (30/40 ×100%), а специфичность тест-системы D составляет 100% (30/30 ×100%), а, следовательно, тест-система D лучше тест-системы С. Такого вида выводы можно встретить в докладах на многих конференциях и даже иногда в публикациях в научных журналах. Как более правильно обработать результаты таблицы? Мож- но сделать только некоторые оценки. Если заболевание достаточно мало распространено, и образцы отбирались от случайных паци- 25 ентов (не в группе риска), можно предположить, что из 1000 паци- ентов не менее 950 – здоровы. Тогда из 950 здоровых тест-система С признала здоровыми 940 пациентов (10 ошибочно признаны больными, так как не подтверждены методом Е); таким образом, специфичность тест-системы С не менее 98% (940/950×100%). Что можно сказать о тест-системе D? Из приведенных данных можно оценить чувствительность. Тест-система D признала больными 30 пациентов, которые признаны больными тест-системами С и Е, таким образом чувствительность тест-системы D близка к 100%. Если бы с помощью тест-системы D были проверены все 1 000 па- циентов, тогда можно было бы сравнить специфичности обеих тест- систем. Еще более точные расчеты можно было бы провести, если бы все пациенты были проверены с помощью метода Е. Поэтому на основании таблицы можно сделать примерно такой вывод: «Тест-система С имеет специфичность более 98%, тест- система D имеет чувствительность около 100%. При этом надо учитывать, что специфичность тест-системы С оценена более точно (на 1000 образцах), чем чувствительность тест-систе- мы D (оценена на 30 образцах). Полученные данные не позво- ляют сравнить качество тест-систем». Пример 2. Лаборатория проверяет с помощью панели А чувствительность и специфичность тест-системы В. Затем другая лабо- ратория проверяет с помощью той же панели А чувствительность и специфичность тест-системы С. Можно ли сравнивать на основа- нии полученных данных тест-системы В и С? Чаще всего – нельзя, так как лаборатории могут сильно отличаться как по оборудова- нию, так и по квалификации персонала. Пример 3. С помощью тест-систем А и В проверяется доста- точно большой контингент пациентов. По результатам составляет- ся таблица примерно следующего вида: Тест- система Количество образцов, признанных отрицательными Количество образцов,признанных положительными Процент признаных положительными А 980 20 2 B 970 30 3 Таблица 3 26 На основании данных таблицы делается вывод о том, что тест-система В имеет более высокую чувствительность, чем тест-система А, а тест-система А имеет более высокую спе- цифичность. По данным этой таблицы ничего нельзя сказать ни о чувс- твительности обеих тест-систем, ни о специфичности, так как неизвестно, кто из пациентов болен (инфицирован), а кто здоров. Вполне возможна ситуация, при которой все 20 образцов, признанных положительными в тест-системе А, действительно при- надлежат больным, которых всего 20 (чувствительность А = 100%). А из 30 образцов, признанных положительными в тест-системе В, только 10 взяты от больных, которых всего 20 (чувствительность В = 50%). Пример 4. Тест-система А при проверке на 2-3 положитель- ных сыворотках дает более высокий сигнал, чем тест-система В. Обе тест-системы проявляют сыворотки как положительные. Дела- ется вывод о том, что тест-система А более чувствительна, чем тест-система В. Данный вывод слабо обоснован – вполне возможно, что на большей выборке аттестованных положительных сывороток тест- система В может проявить правильно равное или большее коли- чество сывороток, чем тест-система А. Пример 5. С помощью тест-системы А исследуются сыворот- ки 220 трупов на наличие антител к ВИЧ с целью проверки при- годности тест-системы для ВИЧ-контроля донорского трупного ма- териала. Два образца проявили себя как положительные, осталь- ные – как отрицательные. Положительные образцы при проверке методом вестерн-блоттинга проявили себя как отрицательные. На основании проведенной работы утверждается, что тест-систе- ма А может быть использована для определения антител к ВИЧ в донорской трупной крови. (Материалы VII съезда ВОЭМП). Так как ВИЧ-инфекция слабо распространена в России, мож- но применить рассуждения, приведенные в примере 1, то есть оценить специфичность (218/220×100%=99%). Для правильной проверки тест-системы А необходимо дополнить работу иссле- дованиями образцов, полученных из крови трупов ВИЧ-инфици- рованных. Только тогда можно утверждать о пригодности или непригодности тест-системы для работы с донорской трупной кровью. 27 |
Похожие:
 |
Анализ причин приостановки и отказа при постановке земельных участков ... |
 |
Барометрическое нивелирование При надлежащей постановке работ с помощью барометрического нивелирования можно получить также и абсолютные высоты пунктов наблюдения,... |
|
Рекомендации по обнаружению и устранению неисправностей При постановке перемычек с провода Э301 убедиться в отсутст- вии предохранителей аб некалиброванного сечения |
|
Факультет: лпф курс: V Очень часто друзья говорят больному: Как правило, при этой постановке фразы больной за помощью не |
|
Автоматическое складывание зеркал при постановке на охрану Адаптация, в выпадающем длинном списке очень внимательно! ищем строчку (ближе к концу списка) |
|
Порядок заполнения формы «Заявление физического лица о постановке на учет в налоговом органе» Настоящий Порядок заполнения формы «Заявление физического лица о постановке на учет в налоговом органе» (далее в настоящем порядке... |
|
Неотложные заболевания пищевода Кроме того, никто из практических хирургов не скрывает, какие трудности и колебания они испытывают при постановке диагноза и выборе... |
|
Конкурсная документация К на закупку тест-систем для ифа-анализа, реактивов и расходных материалов на 2-е полугодие 2013 года |
|
Конкурсная документация К на закупку тест-систем для ифа-анализа, реагентов, реактивов и расходных материалов на 1-е полугодие 2014 года |
|
Конкурсная документация К на закупку тест-систем для ифа-анализа, реагентов, реактивов и расходных материалов на 2-е полугодие 2014 года |
|
" 21 " августа Набор Иммунофа-тс предназначен для количественного определения содержания тестостерона (ТС) в сыворотке крови человека методом твердофазного... |
|
Порядок заполнения формы Заявление о постановке на учет индивидуального... Порядок заполнения формы «Заявление о постановке на учет индивидуального предпринимателя в качестве налогоплательщика единого налога... |
|
Регламентирующие документы Распоряжение о постановке здания на балансовый учет мук "Вычегодский Дом культуры" |
|
Извещение о проведении запроса котировок на поставку ифа-реактивов Запрос котировок проводится: муз «Вторая городская больница» г. Чебоксары, ул. Гагарина, 53, тел.(8352) 23-48-01, 63-25-37 е-mаil:,... |
|
Инструкция по заполнению учетной формы n 01-тб/У "медицинская карта... ТБ/у заполняется при постановке диагноза "Туберкулез". На случай повторного лечения (рецидив; лечение после неэффективного курса... |
|
Извещение о проведении запроса котировок на поставку ифа-реактивов Запрос котировок проводится: муз «Вторая городская больница» г. Чебоксары, ул. Гагарина, 53, тел.(8352) 23-48-01, 63-25-37 е-mаil:... |