Эпизоотологические особенности, диагностика, лечение и профилактика псевдомоноза и энтерококкоза нутрий
|
Скачать 430.37 Kb.
|
|
Результаты собственных исследований 3.1 Эпизоотическая ситуация по инфекционным болезням нутрий в Краснодарском крае Для изучения эпизоотической ситуации по инфекционным болезням нутрий провели анализ уровня заболеваемости и падежа нутрий от инфекционных болезней в Краснодарском крае в сравнительном аспекте и динамике. За основу были взяты ветеринарная отчетность по инфекционной патологии нутрий в этом регионе за 2008–2012 гг. и результаты собственных исследований – количество и видовой состав выделенных культур возбудителей. Установили, что в течение последних пяти лет (2008-2012 гг.) заболеваемость и падеж нутрий в Краснодарском крае регистрируются ежегодно от различных бактериальных болезней: колибактериоза, псевдомоноза, энтерококкоза, стрептококкоза, стафилококкоза, сальмонеллеза, пастереллеза, анаэробной дизентерии, листериоза. Доминируют среди них колибактериоз, псевдомоноз, энтерококкоз. В нозологическом профиле инфекционной патологии нутрий в Краснодарском крае в данный период колибактериоз составил 31 %, псевдомоноз – 21 %, стрептококкоз и энтерококкоз по – 11%, стафилококкоз – 8 %, сальмонеллез – 7 %, пастереллез – 6 %, анаэробная энтеротоксемия – 3 %, листериоз – 2 % (рис. 1). Рисунок 1 - Нозологический профиль инфекционных болезней нутрий в Краснодарском крае (2008 – 2012 гг.) При изучении удельного веса энтерококкоза в течение срока наблюдения (2008 – 2012 гг.) выявили динамичный рост энтерококкоза нутрий в нозологическом профиле инфекционных болезней нутрий в Краснодарском крае от 11 % (2008 г.) до 26 % (2012 г.). Удельный вес псевдомоноза в инфекционной патологии нутрий в течение последних пяти лет (2008 – 2012 гг.) колебался от 15 до 27 %. Таким образом, псевдомоноз и энтерококкоз в инфекционной патологии нутрий в Краснодарском крае играют важную роль и наносят нутриеводству значительный экономический ущерб. 3.2 Диагностика, клинические признаки, патоморфологические изменения при псевдомонозе и энтерококкозе нутрий Диагностику псевдомоноза и энтерококкоза нутрий проводили на основании эпизоотологических данных, клинических симптомов, патолого-морфологических изменений и лабораторных исследований – бактериологического исследования патологического материала от вынужденно убитых и павших нутрий. Оно включало:
Лабораторные исследования по диагностике псевдомоноза и энтерококкоза нутрий проводили на базе ГБУ «Кропоткинская краевая ветеринарная лаборатория». При изучении клинического проявления псевдомоноза нутрий установили, что псевдомонозом чаще болеет молодняк, начиная с первых дней жизни, но наиболее восприимчивы щенки в возрасте от 45-50 дней до 3-х месяцев. Течение болезни острое. Отмечается потеря аппетита, вялость, повышение температуры (39,5 - 40,5 оС). Нутрии чихают. В дальнейшем у нутрий развивается понос, серозно-гнойные истечения из носовых отверстий, которые в дальнейшем формируют корки. Перед гибелью дыхание учащается и становится напряженным. Беременные самки абортируют или рождают мертвых щенков, отмечаются маститы и эндометриты. Болезнь у новорожденных протекает сверх остро без явных симптомов и с летальным исходом. При патологоанатомическом вскрытии щенков нутрий в 39 % случаев на плевре и брюшине, под капсулой почек и селезенки отмечали ярко выраженный геморрагический диатез, в 31 % выявляли серозно-катаральную или серозно-геморрагическую бронхопневмонию, в 15 % отмечали альтеративный гепатит, в 10 % определяли альтеративный нефрит и в 5 % - альтеративный миокардит. При патогистологическом исследовании у большинства животных в легких отмечали серозно-катаральную или серозно-геморрагическую бронхопневмонию, у нескольких животных - некротическую бронхопневмонию, которая характеризовалась некрозом воздухопроводящего и респираторного отдела легких. В почках у большинства животных регистрировали зернистую или жировую дистрофию эпителия канальцев. Зернистая дистрофия характеризовалась неравномерным окрашиванием цитоплазмы и увеличением объема эпителиоцитов. В отдельных канальцах отмечали некроз, который сопровождался пикнозом, лизисом или рексисом ядер. В печени в большинстве случаев выявляли зернистую дистрофию, которая характеризовалась нарушением балочной структуры в виде искривления и дискомплексации балок, а также увеличением размера гепатоцитов, приобретением округлой формы и неравномерной окраской цитоплазмы. В сердце отмечали зернистую дистрофию и атрофию миокарда, которая характеризовалась истончением кардиомиоцитов, неплотным прилеганием их друг к другу. К энтерококкозу восприимчивы нутрии всех возрастов, но чаще всего заболевали беременные самки и щенки в возрасте от 1 до 3-х месяцев. Заболевание возникало в период массового щенения самок, при отсадке потомства и формировании групп для косячной случки. В основном энтерококкоз нутрий протекал остро. У больных животных отмечали повышение температуры до 41 0С, выделение кровянистой жидкости из носовых ходов, поносы с примесью крови, снижение и отсутствие аппетита, парез задних конечностей. Больные животные погибали в течение 3-5 суток. У больных самок рождались недоразвитые или мертворожденные щенки, а также происходили массовые аборты во второй половине беременности. В некоторых случаях болезнь заканчивалась гибелью беременных самок. При патологоанатомическом исследовании у абортированных плодов и мертворожденных щенков в 37 % случаев отмечали катарально-геморрагический или серозно-геморрагический гастроэнтероколит, в 26 % - белковую и жировую дистрофию печени и миокарда, в 23 % - геморрагический диатез на плевре, брюшине, под капсулой почек и селезенки, в 6 % - продуктивный или геморрагический спленит, в 4 % - серозно-катаральную бронхопневмонию и в 4 % - интерстициальный продуктивный нефрит. При гистологическом исследовании в желудке и кишечнике выявляли острое серозно-геморрагическое воспаление, которое характеризовалось слизистой дистрофией желудочных желез и кишечных ворсинок, некрозом и десквамацией эпителия, гиперемией сосудов и геморрагиями. В сердце отмечали зернистую дистрофию и атрофию кардиомиоцитов, гиперемию сосудов и геморрагии. В печени отмечали зернистую и жировую дистрофию, кариолизис и кариопикноз гепатоцитов, дискомплексацию балок и пролиферацию лейкоцитов, преимущественно нейтрофильного и лимфотического ряда. В желудочных, брыжеечных и портальных лимфатических узлах в фолликулах отмечали увеличение количества малых и средних лимфоцитов, а также гиперемию синусов. В почках определяли острый диффузный интерстициальный нефрит, который характеризовался пролиферацией клеток соединительной ткани с преобладанием в пролиферате полибластов и эпителиоидных клеток. 3.3 Разработка технологии изготовления и контроля инактивированных моно- и ассоциированной вакцин против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий Коммерческие вакцины против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий в России не выпускаются. Эпизоотическая ситуация по инфекционной патологии нутрий в Краснодарском крае за последние пять лет (2008–2012 гг.) свидетельствует о необходимости специфической профилактики псевдомоноза и энтерококкоза нутрий. Поэтому на следующем этапе исследований нами была отработана технология изготовления новых моно- и ассоциированной вакцин против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий. С этой целью изучили биологические свойства 315 культур P. aeruginosa и E. fаecalis, выделенных от нутрий. Основываясь на проведенных исследованиях по иммуногенности, антигенности, стабильности подобрали штаммы P. aeruginosa (О18), E. faecalis для изготовления вакцин. Накопление бактериальной массы культур P. aeruginosa и E. faecalis, отобранных для производства вакцин, изучали на питательных средах: МПБ с 1 % глюкозы, глюкозо-сывороточном бульоне, бульоне Хоттингера с 1 % глюкозы. Наиболее доступным и дешевым является МПБ с глюкозой, который и был взят нами для получения бактериального сырья для производства вакцин. Применение МПБ дает возможность достичь необходимой концентрации микробных клеток – 4-8 млрд м.к./см3. Штаммы P. aeruginosa, E. faecalis для изготовления опытных образцов ГОА-формолвакцин освежали в МПБ с 1% глюкозы, рН 7,4 - 7,6, при 37 ºС, в течение 18–20 ч. Культуры контролировали на чистоту роста на питательных средах: МПА, МПБ, агаре и бульоне Сабуро, среде Китта-Тароцци, микроскопией мазков, окрашенных по Граму. Во флаконах объемом 250 мл отдельно нарабатывали матровую расплодку культур P. aeruginosa, E. faecalis. В каждый флакон вносили 80–100 мл МПБ с 1% глюкозы, рН 7,4 - 7,6 и 1-2 мл освеженной культуры P. aeruginosa или E. faecalis концентрацией 4–8 млрд м.к./см3. Посевы инкубировали при 37 ºС в течение 18–24 ч с последующей проверкой на чистоту роста на вышеуказанных питательных средах, микроскопией мазков, окрашенных по Граму. В 3–5-литровых ёмкостях нарабатывали биологическую массу P. aeruginosa, E. faecalis. В каждую из них вносили МПБ с 1 % глюкозы и 5–10 % матровой расплодки культуры от объема питательной среды. Посевы инкубировали при 37 ºС в течение 18–24 ч, рН 7,7 - 7,8. Культуры проверяли на чистоту роста на вышеуказанных питательных средах, микроскопией мазков, окрашенных по Граму. Инактивацию бактериального сырья с концентрацией P. aeruginosa, E. faecalis 4–8 млрд м. к./см3 проводили отдельно путем внесения 0,4 % формалина в конечной концентрации при температуре 37 ºС продолжительностью 48–96 ч. Проверяли полноту инактивации посевом на МПА, МПБ, среду Эндо, агар и бульон Сабуро, среду Китта-Тароцци. При наличии роста проводили контроль безвредности на белых мышах и наблюдали за их клиническим состоянием в течение 10 дней. В процессе исследований разработали наиболее оптимальные режимы инактивации для P. aeruginosa и E. faecalis нутрий, основанные на действии 0,4 % формалина при температуре 37±3 °С. Это позволило существенно – в 4 раза уменьшить время инактивации микроорганизмов в отличие от традиционной технологии. Инактивированную бактериальную массу стандартизировали путем доведения до концентрации 4 млрд м.к./см3 и внесения адъюванта – 6 %-ного гидрата окиси алюминия до 10; 20; 30 % к объему и выдерживания с ним при температуре 20–25 °С 12–24 ч. На основании полученных данных в процессе исследований нами разработано схематическое представление технологии производства инактивированной ассоциированной вакцины против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий. 3.4 Исследование иммунобиологических свойств моно- и ассоциированной вакцин против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий в опытных условиях На основе вирулентных штаммов P. aeruginosa и E. faecalis по разработанной нами технологии были изготовлены экспериментальные образцы инактивированных моновакцин против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий: серия № 1 - гидроокисьалюминиевая формолвакцина (ГОА-формолвакцина); серия № 2 - формолвакцина с масляным адъювантом; серия № 3 - формолвакцина без адъюванта. При изучении иммуногенности и безвредности серий вакцин на нутриях в возрасте 45-60 дней установили, что после однократной внутримышечной прививки зверей одной из ГОА-формолвакцин в дозе 0,5 см³ у животных через 14 суток формируется напряженный иммунитет, обеспечивающий 80 % защиту животных от возбудителя соответствующей инфекции. У нутрий, иммунизированных формолвакцинами с масляным адъювантом и формолвакцинами без адъюванта, защита животных от возбудителя соответствующей инфекции составила 60%. При определении иммунобиологических свойств ГОА-формолвакцин против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий после двукратной внутримышечной прививки (первая доза – 0,5 см³, вторая – 1,0 см³ с интервалом 10 суток) у животных не наблюдали поствакцинальных осложнений, через 14 суток после ревакцинации у привитых зверей формировался напряжённый иммунитет, обеспечивающий 100%-ную защиту животных от возбудителя соответствующей инфекции. Таким образом, разработанные нами и испытанные в лабораторных условиях ГОА-формолвакцины против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий были безвредными и высокоиммуногенными, обеспечивали после одно- и двукратной иммунизации соответственно 80 и 100 %-ную защиту животных от возбудителя соответствующей инфекции. Учитывая широкое распространение псевдомоноза и энтерококкоза в нутриеводческих хозяйствах Краснодарского края и их ассоциативное течение, а также отсутствие коммерческой ассоциированной вакцины против данных болезней нутрий, по разработанной нами технологии на основе выделенных и изученных штаммов P. aeruginosa и E. faecalis накапливали раздельно бактериальное сырье. После инактивации его раствором формалина в 0,4 % концентрации при температуре 37±3 °С и проверки полноты инактивации компоненты смешивали в разных соотношениях (1:1; 1:2; 1:3), добавляли 10, 20, 30 % гидрата окиси алюминия, перемешивали, выдерживали в течение суток при температуре 19-25 0С, фасовали во флаконы с последующей укупоркой и оценивали качество по разработанным нами методам контроля. Иммуногенность вакцины оценивали на белых мышах массой 17– 22 г, предварительно определив для них иммунизирующую дозу антигенов псевдомоноза и энтерококкоза, а также соответствующие дозы для заражения данными вирулентными возбудителями. Исследования показали, что через 14 суток после однократной подкожной прививки ассоциированной вакциной против псевдомоноза и энтерококкоза в дозе 0,5 см3 у белых мышей формировался напряженный иммунитет, обеспечивающий соответственно 80 и 90 %-ную защиту лабораторных животных от P. aeruginosa и E. faecalis. Поствакцинальных осложнений у белых мышей не отмечали. Учитывая, что иммуногенная активность ассоциированных вакцин во многом зависит от правильного подбора их компонентов, мы изучили влияние соотношения антигенов и компонентов в ассоциированной вакцине против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий на ее иммуногенную активность. Выявлено, что при соотношении антигенов псевдомоноза и энтерококкоза 1:1 и 20 % гидрата окиси алюминия ассоциированная вакцина через 14 суток после двукратной иммунизации белых мышей подкожно с интервалом 10 суток в дозе 0,5 см3 обеспечивала соответственно 80 и 90 %-ную защиту лабораторных животных от P. aeruginosa и E. faecalis. Поствакцинальных осложнений у животных не отмечали. На следующем этапе исследований определили оптимальную иммунизирующую дозу ассоциированной вакцины против псевдомоноза и энтерококкоза для нутрий. Для этого брали по 4 животных в возрасте 1,5-2 месяца на каждую дозу биопрепарата (0,25; 0,5; 1,0; 2,0 млрд микробных клеток) и прививали однократно внутримышечно в область бедра. Установили, что оптимальной иммунизирующей дозой ассоциированной вакцины против псевдомоноза и энтерококкоза для нутрий является 1,0 млрд микробных клеток каждого вида. Такая доза обеспечивает 100 %-ную защиту вакцинированных нутрий от вирулентных возбудителей псевдомоноза и энтерококкоза при 100 %-ных заболевании и гибели невакцинированных животных (контроль). Иммуногенность и безвредность ассоциированной вакцины против псевдомоноза и энтерококкоза оценивали на 5 нутриях в возрасте 1,5-2 месяца. Биопрепарат вводили внутримышечно однократно в дозе 1,0 см3. Через 14 суток после вакцинации заражали иммунизированных и не привитых нутрий P. aeruginosa (2 млрд м.к./см3) и E. faecalis (2 млрд м.к./см3). У нутрий через 14 суток после однократной внутримышечной прививки ассоциированной вакциной в дозе 1,0 см3 формировался напряженный иммунитет, обеспечивающий соответственно 80 и 100 %-ную защиту животных от P. aeruginosa и E. faecalis. Поствакцинальных осложнений у животных не отмечали. На следующем этапе исследований изучили влияние различных доз и схем иммунизации нутрий ассоциированной вакциной против псевдомоноза и энтерококкоза. Для этого пушных зверей в возрасте 1,5-2 месяца иммунизировали внутримышечно двукратно с интервалом 7 суток (первая доза – 0,5 см3, вторая – 1,0 см3) и 10 суток (первая доза – 1,0 см3, вторая – 1,5 см3) и через 14 суток после ревакцинации привитых животных вместе с контрольными (не вакцинированными) реинфицировали P. aeruginosa и E. faecalis. За нутриями вели наблюдение в течение 30 дней. Установили, что у нутрий после иммунизации ассоциированной вакциной двукратно с интервалом 7 суток формировался иммунитет, обеспечивающий 100 %-ную защиту животных от P. aeruginosa и 60 %-ную защиту нутрий от E. faecalis, с интервалом 10 суток – 100 %-ную защиту пушных зверей от P. аeruginosa и E. faecalis (таб. 1). |
Похожие:
 |
Профилактика и лечение сопутствующих заболеваний Российской Федерации в соответствии с условиями Соглашения между Российской Федерацией и Международным банком реконструкции и развития... |
 |
Клинические рекомендации диагностика, лечение и профилактика токсикозов... Диагностика, лечение и профилактика токсикозов беременных в практике семейного врача |
|
2. Эмпиема плевры Определение понятий. Классификация. Острый и хронический абсцесс легкого. Клиника, диагностика и лечение. Медикаментозное и хирургическое... |
|
I. Общие сведения Профилактика, диагностика, лечение заболеваний и/или состояний глаза, его придаточного аппарата и орбиты, реабилитация пациентов |
|
Профилактика и лечение гриппа и орви профилактика заболеваний у детей. Советы Комаровского Профилактика и лечение гриппа и орви становится достаточно острым вопросом особенно в осенне-зимний период. Обратим внимание на советы... |
|
Методические рекомендации студентам по проведению практического занятия... Ранняя диагностика, лечение, профилактика, диспансерное наблюдение и реабилитация детей с иммунодефицитными состояниями |
|
Методические рекомендации студентам по проведению практического занятия... Ранняя диагностика, лечение, профилактика, диспансерное наблюдение и реабилитация детей с иммунодефицитными состояниями |
|
Методические рекомендации студентам по проведению практического занятия... ... |
|
Хронические конъюнктивиты (клиника, диагностика, лечение, профилактика).... Заведующий кафедрой глазных болезней Владивостокского государственного медицинского университета, проф., д м н. Мельников В. Я |
|
Методические указания му 2… Лабораторная диагностика, лечение и профилактика особо опасных микозов. Методические указания. 2009. 66 с |
|
Клинические рекомендации диагностика, лечение и профилактика хронической... Польза и эффективность диагностического или лечебного воздействия доказаны и/или общепризнанны |
|
Приказом управления ветеринарии Профилактика, диагностика и лечение инфекционных, инвазионных и массовых незаразных болезней животных и болезней, общих для людей... |
|
Внепищеводные проявления гастроэзофагеальной рефлюксной болезни (клиника,... Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении Высшего профессионального образования «Московский государственный медико-стоматологический... |
|
Перечень тем к комплексному экзамену «диагностика и лечение в хирургии»... Асептика, понятие, цель, задачи, основоположники. Источники и пути распространения инфекции. Современные приказы и СанПин мз РФ по... |
|
Клинические рекомендации для врачей общей практики гломерулонефритЫ:... Принципы и алгоритм клинико-лабораторной и инструментальной диагностики заболевания у взрослых, детей, лиц пожилого возраста, беременных... |
|
Методические рекомендации для студентов 6 курса педиатрического факультета... «Герпесвирусные инфекции (цмви, ветряная оспа, опоясывающий герпес, Эпштейн-Барр вирусная инфекция). Клиника. Диагностика и дифференциальная... |